Kapilární elektroforéza 4. část - Rozdělení kapilárních technik, chirální separace

  Delicio.us - save this page
600

Kapilární elektromigrační techniky se mohou lišit náplní kapiláry, ať už je to roztok základního elektrolytu u kapilární elektroforézy, základní elektrolyt s micelárními aditivy u micelární elektrokinetické chromatografie nebo stacionární fáze u kapilární elektrochromatografie. 

Rozdělení metod s vyznačením podobnosti technik dle organizace IUPAC [4] je na Obr. 15.

Obr. 15: Rozdělení kapilárních elektromigračních technik dle IUPAC.

Názvy technik jsou uvedeny bez překladu, jejich bližší vysvětlení je popsáno níže:

CE dříve označována jako CZE (zónová) nebo volná elektroforéza, separace v elektrickém poli se uskutečňuje díky rozdílných mobilit analytů
CIEF kapilára je naplněna elektrolytem v gradientu pH, separují se amfoterní analyty dle rozdílných isoelektrických bodů
SCE vnitřní prostor kapiláry vyplněn molekulárním sítem, dělení se provádí na základě velikost a tvaru analytu
CGE molekulární síto (viz SCE) je tvořeno gelem
CITP izotachoforetické dělení v kapilárním uspořádání
ACE separace je dosahována jak pomocí rozdílných mobilit tak díky (bio)specifickým interakcím analytu a látek přidaných do základního elektrolytu
ECC základní elektrolyt je dotován aditivy, které ovlivňují separaci
MECC viz ECC, látky tvořící micely jsou přidány do základního elektrolytu
MEECC viz ECC, mikroemulgované částice jsou přidány do základního elektrolytu
CEC vnitřní prostor kapiláry je tvořen chromatografickou stacionární fází (ať už potažením stěn kapiláry, plněním nebo tvorbou monolitické fáze)

Chirální separace Chirální separace pomocí kapilárních elektromigračních technik se opírá o stejné teoretické základy jako bylo uvedeno v předchozích kapitolách. Přístupy k separaci jsou dva: převést optické izomery na diastereoizomery pomocí molekulární kovalentní modifikace a aplikovat kapilární elektroforézu (nepřímá chirální separace) nebo přidat k elektroforetické separaci další mód v podobě přítomnosti chirálního selektoru [6] (přímá chirální separace, viz Obr. 16 a Obr. 17).

Obr. 16: Ilustrace principu přímé chirální separace – vznik komplexů s různou stabilitou.

Obr. 17: Přímá chirální separace pomocí kapilárních elektromigračních technik – přehled chirálních selektorů užívaných k separaci optických izomerů [6,7,8,9].

Přímá chirální separace je založena na vzniku reverzibilních komplexů selektor-selektand (analyt a jeho optický izomer), jejichž rovnovážná konstanta je různá. V důsledku toho je jeden izomer retardován na vzniklé pseudostacionární fázi v elektrickém poli více než druhý a při vhodně zvolených podmínkách tak dochází k separaci optických izomerů. Selektor může být buď přidán do základního elektrolytu, nebo může být inkorporován do stacionární fáze, viz Obr. 18. Struktura cyklodextrinů jakožto základních chorálních selektorů viz Obr. 19.

Obr. 18: Základní možnosti uspořádání přímé chirální separace pomocí kapilárních elektromigračních technik (analyt-červená částice, selektor-modrá kavita).

 

Obr. 19: Příklad nesubstituovaných cyklodextrinů jakožto základních chirálních selektorů.

 



Produkty

Články

Seznam všech článků

REKLAMA

VÚFB

LinkedIn - Pragolab s.r.o.

YouTube - Pragolab

Údaje o firmě